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水产用蛭弧菌问(2)

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关键词:

摘要：

图1 （出自：孙秋平.蛭弧菌的分离纯化及保质期的研究[D].华南理工大学,2014.）

图2 48,000倍下的蛭弧菌[出自：宋志萍、蔡俊鹏、王志、韩韫，蛭弧菌的分离及其生长条件和裂解能力的研究，微生物学报，2005，45（4）：573.]

图3 氦离子显微镜下的蛭弧菌（像素大小0.75纳米）[出自：Said N ,Chatzinotas A ,Schmidt M .Have an Ion on It:The Life-Cycle of Bdellovibrio bacteriovorus Viewed by Helium-Ion Microscopy[J].2018.]

——寄生的特异性也对我们的实际使用方法有很大的影响，即蛭弧菌是不是不管好菌坏菌都会攻击？如果是这样的话，那么很难被我们所用了，但实际上，其有一定倾向性，这就给我们实际的应用提供了更多的可能性。

郭衍彪（2016年）的研究指出，蛭弧菌BDW03对试验组大菱鲆肠道没有控制作用的菌属为8个（占53.3%），这8个菌属中多为革兰氏阳性菌属（6/8）。另外，其通过乳酸菌拌食饵料和泼洒BALOs喂食大菱鲆60d后，乳酸菌和BALOs对大菱鲆肠道菌群中革兰氏阴性菌的控制作用（分别占总菌属的33.3%和26.7%）优于对革兰氏阳性菌的控制作用（分别占总菌属的（26.7%和20.0%）。这也间接指出了蛭弧菌对细菌的裂解可能有一定的偏向性。

另外，结合陈家长等人（2003）、徐琴等人（2006）、陈丽芸（2012）的研究，我们至少可以获得以下结论。

第一、不同类型的蛭弧菌能裂解的宿主菌是有差异的；

第二、蛭弧菌可以和光合细菌中的球形红假单胞菌混合使用，也可以间隔7d使用，外泼效果都非常好。蛭弧菌和粘红酵母混合使用，外沷效果不佳；同时外用蛭弧菌的效果控制时间至少可以达到2周，即14d的时间。而且这还是受限于方案的要求。

第三、蛭弧菌不裂解乳酸杆菌。

第四、在斑节对虾的试验研究中，蛭弧菌和枯草芽孢杆菌混合外沷使用没有单独使用蛭弧菌效果好。但混合使用比不使用的对照组在控制总菌上效果要好。

第五、对大菱鲆的内服研究表明，蛭弧菌对肠道内芽孢杆菌属的增殖影响比较小。

6 蛭弧菌和化学消毒剂的差别在哪里？

化学消毒剂包括抗生素的杀菌都有一个特征，来得快去得快，在达到一定浓度下，化学消毒剂的效力可能会在4个小时左右达到最高峰，细菌总数下降到最低，然后细菌总数会出现反弹，但消毒剂仍有效果，总菌数有可能在12～24h左右反弹超标，超过原来的细菌总数，当然，细菌的种类发生了变化。

而蛭弧菌可能在前1～2d内看不出来什么效果，但如果其能发挥效果，那么控菌的时长有可能达到15d以上，甚至20d以上，在此期间，总菌数、弧菌数相对于对照组可能会低1～2个数量级。

比如张吕平等人（2009）的研究指出，对虾池水体分别泼洒二氯异氰脲酸、季胺盐络合碘和蛭弧菌。当每隔20d左右分别进行一次上述水体处理,通过比较体内弧菌感染的对虾个体数,发现从肝胰腺分离到弧菌的对虾数量二者无显著差异,但从血淋巴分离到弧菌的对虾数量,蛭弧菌处理组显著少于化学消毒剂处理组。

能长期控菌，这是蛭弧菌的优势所在，也是与化学消毒剂最大的差异所在。

7 蛭弧菌耗氧么？可以扩培么？

蛭弧菌是严格的好氧菌，它的繁殖需要氧气，但它对池塘的溶氧几乎又没有什么干扰，为什么？因为它的繁殖速度太慢了。

有多慢，请参看上第四问。

另外，我们都知道，可以用红糖等碳源对乳酸菌及EM菌进行扩培，那蛭弧菌可以用这些营养物质扩培么？很明确，不可以。

因为蛭弧菌不利用碳水化合物，所以无法用碳源进行扩培。

实际上从自然界分离得到的蛭弧菌都是依赖寄生型，迄今为止，还没有直接从自然界分离得到非寄生型。不依赖宿主的蛭弧菌，只能生活在实验室条件下。

8 蛭弧菌有哪些产品可以选择？

市面上的蛭弧菌有三种：液体的、粉末状的、冻干粉。

图4 氦离子显微镜下的大肠杆菌（左）和葡萄球菌（右）细胞被蛭弧菌感染的图片。像素尺寸为1nm。[出自：Said N ,Chatzinotas A ,Schmidt M .Have an Ion on It:The Life-Cycle of Bdellovibrio bacteriovorus Viewed by Helium-Ion Microscopy[J].2018.]

图5 蛭弧菌的繁殖周期示意图[出自：Makowski L ,Trojanowski D ,Till R ,et of chromosome replication and its relationship to predatory attack lifestyles in Bdellovibrio bacteriovorus[J].Applied and Environmental Microbiology,2019,85(14):-.]

液体使用方便，但菌数容易掉。而且蛭弧菌液体的产品始终面临保存的问题，实际上也有很多的论文对此做了研究，有的文章指出，大多数的液体蛭弧菌产品在4℃的环境下，可以保存8个月以上，少数6个月以上。但在25℃的环境下，蛭弧菌液体产品的保质一般只在4～6个月了。当然随着保护剂的不断研发，随着添加不同的保护剂，在4℃的环境下，某些液体产品的保质期可以达到15个月以上，有的可以达到两年以上，但是所有的保存环境温度都指向4℃，这对我们实际的销售场景是不太相符的。当然，液体也有好处，菌种复苏时间快，如果从实际销售出发，建议在经销点增设冷藏柜，这样可以延长液体产品的保持期。

文章来源：《水产学报》网址: http://www.scxbzz.cn/qikandaodu/2021/0505/721.html